Revolucionando a Eletroforese: Labgel – Uma Abordagem Inovadora para Géis de Agarose com Melhor Desempenho e Facilidade de Preparo

O Labgel é uma inovação que proporciona uma significativa melhoria na performance de géis de agarose. Este composto moderno consiste em um polissacarídeo modificado, que, ao ser combinado com agarose, forma um sistema binário conectado por pontes de hidrogênio. A formação desse tipo de gel ocorre ao pesar e dissolver Labgel e agarose em tampão. O composto dilui-se mais rapidamente do que a agarose sozinha, mantendo a mesma temperatura. Em comparação com a agarose simples, o Labgel-Agarose exibe maior elasticidade, transparência aprimorada e melhor resolução. Géis contendo uma mistura de 0,7% de Labgel e 0,7% de agarose proporcionam uma separação mais eficaz de fragmentos de DNA do que 2% de agarose isolada. Notavelmente, o Labgel substitui uma parte da agarose, sendo que duas partes de agarose são substituídas por uma parte de Labgel.

Instruções passo a passo:

Materiais necessários:

• Labgel
• Agarose
• Etanol
• Tampão: Solução 0,5X TPE tampão (0,04 Tris base, 0,004 M EDTA, pH ajustado para 8,0 com ácido fosfórico). Alternativamente, 1X TAE ou 0,5X TBE podem ser utilizados.

Instruções:

1. Pese a agarose e coloque-a em um frasco. A concentração de agarose é geralmente fixada em 0,7%.
2. Calcule e pese o Labgel, normalmente entre 0,2% – 2,0%. Concentrações mais elevadas de Labgel (3,0% – 4,0%) podem ser utilizadas para fracionamento de moléculas muito pequenas (100bp ou menos). A concentração do Labgel é derivada da concentração de agarose, subtraindo 0,7% e multiplicando por 0,5.
3. Adicione o Labgel ao frasco e misture-o com a agarose.
4. Sature a mistura com etanol (suficiente para cobrir o fundo do frasco).
5. Adicione gradualmente 0,5X TPE tampão ou um tampão alternativo durante agitação suave para prevenir aglomerações.
6. Dissolva a suspensão aquecendo-a. A temperatura para essa diluição é a mesma utilizada para agarose sozinha.

Nota sobre possível problema:

• Para facilitar a remoção do pente do gel, utilize pentes sempre muito limpos.

Como calcular a quantidade necessária de Labgel:

Instruções passo a passo para calcular a quantidade de Labgel necessária ao preparar um gel funcional equivalente Labgel/Agarose:

1. Qual porcentagem de agarose é normalmente usada?
2. Subtraia 0,7% da agarose total.*
3. Divida a diferença por 2. O resultado é a porcentagem de Labgel a ser adicionada para os 0,7% de agarose.

*Os 0,7% representam a concentração mínima de agarose requerida para um gel estável.

Exemplos:

• Converter 1% de agarose gel para 1% Labgel/Agarose gel.

a) Subtraia 0,7% de 1% de agarose; 1 – 0,7 = 0,3%.

b) Divida a diferença por 2; 0,3 / 2 = 0,15%.

c) 0,15% é a quantidade de Labgel a ser adicionada a 0,7% de agarose, para produzir um gel funcional equivalente a 1% de agarose.

• Converter 1,5% de agarose gel para 1,5% Labgel/Agarose gel.

a) Subtraia 0,7% de 1,5% de agarose; 1,5 – 0,7 = 0,8%.

b) Divida a diferença por 2; 0,8 / 2 = 0,4%.

c) 0,4% é a quantidade de Labgel a ser adicionada a 0,7% de agarose, para produzir um gel funcional equivalente a 1,5% de agarose.

• Converter 2,0% de agarose gel para 2,0% Labgel/Agarose gel.

d) Subtraia 0,7% de 2,0% de agarose; 2,0 – 0,7 = 1,3%.

e) Divida a diferença por 2; 1,3 / 2 = 0,65%.

f) 0,65% é a quantidade de Labgel a ser adicionada a 0,7% de agarose, para produzir um gel funcional equivalente a 2,0% de agarose.

Tecnologia Labgel: Elevando a Performance dos Géis de Agarose

O Labgel, composto por 1 polissacarídeo modificado, é a inovação que redefine a eletroforese, oferecendo aprimoramentos notáveis quando combinado com diferentes concentrações de agarose. Ao adicionar Labgel 1,5% e agarose 0,7% (SeaKemÒ LE), ou explorar alternativas como Agarose NuSieve 4%, os resultados são notáveis.

Este avançado composto proporciona:

• Melhoria significativa em todas as separações de DNA em géis de agarose;
• Transparência excepcional nos géis;
• Distinção clara entre bandas, mesmo para fragmentos próximos;
• Qualidade aprimorada na fotodocumentação.

Além desses benefícios, a economia de gel pode atingir mais de 50%, dependendo da quantidade de Labgel utilizada. Descubra o futuro da eletroforese com a tecnologia Labgel – uma revolução que maximiza eficiência, resolução e economia.