Kit de Extração e Purificação de RNA 13-BR850-25
O Kit 13-BR850-25 é uma solução eficiente e versátil para extração e purificação de RNA. Ele é adequado para diversas amostras biológicas, como sangue, plasma, urina, swabs nasofaríngeos e, com algumas adaptações, tecidos animais. Além disso, o kit utiliza colunas de sílica de alta capacidade para fornecer RNA purificado, pronto para análises moleculares, como qPCR e RT-qPCR.
Especificações Técnicas do Kit
Compatibilidade de Amostras
- Sangue Total, Plasma e Soro: 200 µL por extração.
- Urina: 2 mL, processada para obtenção do pellet.
- Swabs Nasofaríngeos: Amostras diluídas em meio apropriado.
- Tecido Animal (adaptado): 20-30 mg de tecido fresco ou congelado.
Composição do Kit (250 extrações)
O kit inclui componentes essenciais para um processo eficiente, tais como:
- Hemalise-RBC 10X: 9,0 mL.
- Carreador de RNA liofilizado: 1 frasco.
- Proteinase K (PK) liofilizada: 1 frasco.
- Tampões de Lise, Lavagem e Eluição.
- Colunas de Sílica e Tubos Coletores.
Equipamentos Necessários (não inclusos)
Para garantir a máxima eficiência, você precisará de:
- Centrífuga (20.000 x g ou 14.000 rpm).
- Micropipetas e ponteiras descartáveis com filtro.
- Bloco de aquecimento ou banho-maria (56°C).
- Etanol absoluto (95-100%).
Procedimento para Extração e Purificação de RNA
Amostras Comuns (Sangue, Plasma, Urina e Swabs)
- Preparo da Amostra
- Para sangue, misture 200 µL com 1,8 mL de Hemalise 1X.
- Para urina, centrifugue 2 mL e utilize o pellet.
- Extração
- Primeiro, adicione o tampão de lise, a Proteinase K e o carreador de RNA.
- Em seguida, incube por 10 minutos a 56°C.
- Purificação
- Transfira a mistura para a coluna de sílica.
- Depois, realize lavagens com os tampões A e B.
- Por fim, elua o RNA com o tampão de eluição.
Procedimento Adaptado para Tecido Animal
- Preparo da Amostra
- Pese entre 20 e 30 mg de tecido fresco ou congelado.
- Homogeneíze o tecido em 600 µL de tampão de lise com 10 µL de Proteinase K reconstituída.
- Incubação e Centrifugação
- Para garantir uma lise completa, incube por 10-15 minutos a 56°C.
- Em seguida, centrifugue a 12.000 x g por 3 minutos e transfira o sobrenadante para a coluna de sílica.
- Purificação e Eluição
- Continue com os passos do protocolo padrão, realizando lavagens com os tampões A e B.
- Finalize eluindo o RNA com 50 µL de tampão de eluição.
Vantagens do Kit 13-BR850-25
Este kit oferece diversas vantagens que o tornam indispensável para laboratórios:
- É compatível com diagnóstico in vitro, garantindo confiabilidade.
- Além disso, proporciona alta eficiência em diversas matrizes biológicas.
- Com adaptações simples, pode ser utilizado em tecidos animais.
- Finalmente, o RNA purificado é adequado para análises moleculares de alta precisão.
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