Catálogo nº: 13-11250-01
Apresentação: 100 reações
Armazenamento: – 20ºC
Misture bem antes de usar
DESCRIÇÃO:
A PCR Mix LGC foi otimizada para utilização em rotinas de laboratório para amplificação de fragmentos de DNA de 0,2 a 2,0 kb por PCR. É uma solução pronta para o uso que contém enzima Taq DNA Polimerase, dNTPs, MgCl2 e tampões de reação em concentrações ideais para a amplificação de DNA e cDNA através da técnica de PCR.
COMPONENTES:
Cada sistema contém quantidade de reagentes suficiente para realizar 100 reações de amplificação por PCR em volume final de 50µL.
2 microtubos contendo:
- 1.250 µL PCR Mix LGC, 2X
2 microtubos contendo:
- 1.000 µL Água ultra-pura DEPC tratada, livre de endonucleases.
PCR Mix LGC, 2X:· Taq DNA Polimerase (2,5 U reação) em concentração e tampão de reação adequados, (Tris-HCl pH: 8,5, KCl),
· 200 mM cada dNTP,
· 1,5 mM MgCl2,
PROCEDÊNCIA DA ENZIMA:
A Taq DNA Polimerase recombinante é obtida da bactéria Thermus aquaticus e expressa em E. coli.
CONTROLE DE QUALIDADE:
Ensaios funcionais: A PCR Mix LGC é testada quanto a sua performance através da reação de amplificação em cadeia da polimerase (PCR), do fragmento de 452 pb correspondentes ao gene da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase humano (GAP). O produto de PCR é visualizado em géis de agarose 1,5% sob luz ultravioleta.
PROTOCOLO BÁSICO:
Para cada reação no volume final de 50 µL, separar 25 µL da PCR MIX LGC 2X e adicionar o DNA molde, os primers e água purificada em volume total de 25 µL (os volumes podem ser aumentados proporcionalmente a este calculo básico).
ATIVIDADE ENZIMÁTICA ASSOCIADA:
A enzima Taq DNA polimerase contida na PCR MIX LGC 2X apresenta atividade de polimerização 5’ – 3’, dependente da atividade de substituição da exonuclease, porém carece de atividade de exonuclease 3’ – 5’.
OBS: ESTE PRODUTO É UTILIZADO ESTRITAMENTE EM PESQUISA CIENTÍFICA, NÃO RECOMENDADO PARA O USO EM DIAGNÓSTICO CLÍNICO OU TERAPÊUTICO
